1.研究犀黄丸对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、人肝癌细胞株SMMC7721、人膀胱癌细胞株T24、人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60、人肺腺癌A549细胞株细胞增殖的影响 方法:将不同浓度犀黄丸浸出液,直接加入含肿瘤细胞培养板中,MTT法分别测定其对多种恶性肿瘤细胞株增殖的影响。结果:犀黄丸浸出液对MDA-MB-231、SMMC7721、T24、HL-60、A549肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05;P<0.01),且随浓度的增加,抑制率上升,呈剂量依赖关系,抑瘤作用的IC50以MDA-MB-231、SMMC7721为敏感。结论:体外实验结果表明,犀黄丸对多种人肿瘤细胞增殖有明显抑制作用,不同的恶性肿瘤细胞株对其的敏感性存在较大的差异,其抑瘤作用表现出一定的选择性。提示犀黄丸在传统上用于“乳岩”———乳腺癌的治疗确有一定的科学性,故传统抗肿瘤中药在现代临床使用时也应选择敏感的肿瘤类型。
2. 犀黄丸抗肿瘤的试验研究
2.1体外实验
2．1.1对肝癌细胞的作用 熊氏等采用四唑盐比色法(MTT)检测复方犀黄丸对人肝癌细胞(Be1一7402)的抑制率，结果达39%。10%、15%、20%含药血清组对癌细胞的生长抑制率高于对照组及2．5%、5%组(P<0．05)，其血清浓度与抑制率呈直线、相关。提示复方犀黄丸对肝癌细胞体外生长有一定的抑制作用。另用流式细胞仪分析细胞周期时相分布，显示含药血清处理24 h，S期细胞比例增加，G2-M期细胞减少；处理48 h后，G0/1期细胞增多，S期细胞减少(P<0．01)。提示复方犀黄丸含药血清可干扰人肝癌细胞系细胞周期。熊氏等用犀黄丸含药血清作用于Bel-7402，观察到细胞体积缩小，部分细胞核破裂，呈现大小不等、形态不规则的荧光染色碎片或梅花状核型。染色质固缩，并凝结成块，聚集在核膜周边，呈新月状或肾状，且凋亡细胞数量随含药血清的浓度增加和作用时间延长而增多。李氏等在用不同浓度犀黄丸含药血清作用Bel一7402不同时间后，发现其杀伤率最高达75%，显著高于对照组(P<0．O1)。用SASB法检测Be1一7402细胞的Bc1一2、C-myc基因蛋白表达降低，p53基因蛋白表达增强。李氏等用流式细胞仪检测犀黄丸(含药血清)诱导Be1一7402凋亡过程中发现，DNA琼脂糖凝胶电泳法显示有明显的DNA梯带，同时细胞内游离钙离子浓度明显升高，以凋亡早期明显，可能是诱导肝癌细胞凋亡的机制之一。
金氏等研究发现，犀黄丸浸提液(100、2009L/mL)可显著降低肝癌细胞S}VNC7721分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平(P<0．05，P<0．O1)，且抑制作用有一定的剂量依赖性。5 d时其浸提液2009L/mL比对照组显著降低SMMC7721分泌的亲基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶9、亲基质金属蛋白酶2活性(P<0．05，P<0．O1)；7 d时更为明显，2种浓度均显著降低其活性(尸<0．05，尸<0．O1)，且有一定的剂量依赖性。金氏等用流式细胞术测定2种浓度西黄丸，SMMC7721中Go-G1期细胞比例显著低于对照组(尸<0．O1)，2009L/mL使G：一M期增多(P<0．O1)，表明犀黄丸可特异性地将肿瘤细胞阻滞在G2-M期。
2.1.2对乳腺癌细胞的作用 梁氏等用MTT法检测10%、15%、20%犀黄丸含药血清组对人乳腺癌细胞(MCF一7)的生长抑制，均明显高于阴性对照组(P<0．O1)及2．5%和5%组，血清浓度与抑制率呈直线相关。流式细胞仪周期分析结果显示，含药血清处理24 h，S期细胞比例增加，G2一M期细胞减少：处理48 h后，G0。期细胞增多，s期细胞减少。说明犀黄丸含药血清早期主要影响细胞进入G2-M期，后期主要使细胞停滞于G0/1期，推断其作用机制主要表现在使大部分细胞停滞在DNA合成前期，导致癌细胞发生凋亡。金氏等用MTT法分别测定犀黄丸浸出液对MDA—MB一231、SMMC7721、T24、HL一60、A549肿瘤细胞的增殖，均有明显的抑制作用(P<0．05，P<0．O1)，且呈剂量依赖关系，以MDA—MB一231、SMMC7721为敏感。结论：犀黄丸对多种人肿瘤细胞有明显抑制作用，但敏感性存在较大的差异。
2．2体内实验
唐氏等建立s180实体瘤模型小鼠60只，随机分为4组，并设阴性对照组。结果：联合用药组抑瘤率55．4%，显著高于阴性组(P<0．05)，且高于单用犀黄丸或5一氟尿嘧啶(5 Fu)组(均P<0．05)。提示犀黄丸和5一Fu联合应用具有协同作用。金氏等给予移植性Ul4荷瘤小鼠模型犀黄丸，流式细胞术测定细胞周期。结果：犀黄丸高剂量组中导致Ul4细胞Go G。期细胞比例显著低于模型组(P<0．01)，G2-M期细胞增多(P<0．01)。显示犀黄丸可将肿瘤细胞阻滞在G2-M期，从而发挥抑瘤效应。
3.牛黄为脊索动物门哺乳纲牛科动物黄牛的胆囊结石，含有胆红素、麦角甾醇、卵磷脂、维生素D及钙、铁、铜等多种微量元素及丙氨酸、甘氨酸、牛黄酸、天门冬氨酸、精氨酸和蛋氨酸等氨基酸。麝香含有麝香酮、雄黄酮及多种氨基酸。乳香、没药均为橄榄科植物乳香树与没药树的树脂，主要含树脂、树胶、挥发油。临床药理研究，西黄丸具有抗菌消炎，抗病毒，抗结核，镇静止痛，止血消肿，抗癌以及增强机体抗病能力的作用。对球菌、杆菌有较强的抑制和杀灭作用。故临床多用于各种细菌和病毒引起的化脓性感染、乳腺增生性疾病、刀枪伤痛、跌打损伤。此外，单味牛黄有较好的抗惊厥、退热作用，麝香有强烈的芳香气味，能使心搏、呼吸加快，增加白细胞，临床应用麝香注射液治疗颈淋巴结核有显效，且无副作用，乳香、没药具有扩张外周血管，增加器官血流量，镇痛抗炎作用，促进炎性肿块吸收，提高机体免疫力。