原理：混有乳铁蛋白(LF) 抗原的琼脂糖倾入平板，凝冻后打一些小孔，接入LF样品。随着抗原呈放射形扩散， 在以小孔为中心的环状区域形成抗原�抗体反应沉淀带， 沉淀带在RID染色液的作用下被染色，环的直径与抗体(LF)的浓度成正比。通过标准曲线，可以测出样品中的(LF) 浓度。
操作步骤：将预涂过的玻璃板置于水平桌面上，在琼脂糖缓冲液中 加入150ml(抗血清，仔细混合后将溶液倒在玻璃板中心。表面张力可以阻止溶液溢出，必要时用试管上缘帮助溶液分散以确保溶液均匀分散到玻璃板的各边。 将凝胶在室温下固化15min，然 后置于恒湿器中在冰箱中保存1h 。将打孔器与抽真空设备连接，并利用带模板的隔板架在凝胶上 打16个小孔。用注射器小心地将12.5ml样品注入玻璃板中，将凝胶置于恒湿器中，室温下在水平桌面上放置48h后清洗凝胶。选择正确角度，2次精确测量环的直径，以此来测定LF浓度。
结果计算：每毫升LF的浓度(×10) =
式中：A为LF标准溶液(mg/mL) ；
W为质量(mg) 。